Mysi model udaru zakrzepowo-zatorowego i reperfuzji in situ

1. Leki zaburzające mikrotubule inicjowały syntezę DNA w wolnych od surowicy hodowlach nieproliferujących komórek podobnych do fibroblastów. Dodanie kolchicyny do fibroblastów kurcząt,  myszy  i ludzi w pożywce bez surowicy stymulowało włączanie tymidyny co najmniej dwukrotnie, przy połowie maksymalnego stężenia 1 X 10(-7) M.
2. Ta stymulacja reprezentowała do 75% maksymalnej stymulacji przez  trombinę  i towarzyszyła jej wzrost procentu znakowanych jąder. Inne leki zaburzające mikrotubule wykazywały podobną stymulację, podczas gdy lumikolchicyna nie wywierała żadnego efektu.
3. Pośrednie barwienie immunofluorescencyjne tubuliny wykazało korelację między depolimeryzacją mikrotubul a inicjacją syntezy DNA przez te leki. Dwugodzinne traktowanie 10(-6) M kolchicyną spowodowało całkowite rozerwanie sieci mikrotubularnej i stymulowało włączanie tymidyny (mierzone 28 godzin później) w jeszcze większym stopniu niż ciągła ekspozycja na kolchicynę.
4. Podobna 2-godzinna ekspozycja na 10(-6) M colcemid również stymulowała włączanie tymidyny i prowadziła do 50% wzrostu liczby komórek. Taksol, lek stabilizujący mikrotubule cytoplazmatyczne, blokuje inicjację syntezy DNA przez kolchicynę, co wskazuje, że depolimeryzacja mikrotubul jest niezbędna do tej inicjacji.
5. Aby określić, czy depolimeryzacja mikrotubul jest zaangażowana w stymulację syntezy DNA przez inne czynniki wzrostu,   do komórek dodano wysokooczyszczoną  ludzką  trombinę z lub bez kolchicyny. W żadnym przypadku kolchicyna plus  trombina nie  zwiększyły syntezy DNA powyżej maksymalnej stymulacji przez  samą trombinę .
6. Ponadto wstępne traktowanie kultur taksolem (5 mikrogramów/ml) hamowało około 30% stymulacji wbudowywania tymidyny przez  trombinę .

Razem badania te wykazują, że depolimeryzacja mikrotubul wystarcza do zainicjowania zarówno syntezy DNA, jak i zdarzeń prowadzących do podziału komórek i sugerują, że depolimeryzacja mikrotubul może być wymaganym etapem inicjacji proliferacji komórek przez czynniki wzrostu, takie jak wysoko  oczyszczona  ludzka  trombina .