-
- Zajęliśmy się potrzebą oceny histologicznej domen miokomórkowych zajmowanych przez transportery monokarboksylowe (MCT1, MCT2 i MCT4). Z perspektywy hipotez wahadłowych mleczanu założyliśmy, że MCT1 będzie silnie wyrażany we włóknach oksydacyjnych, podczas gdy MCT4 będzie znajdować się we włóknach wysoce glikolitycznych.
- Ponadto postawiliśmy hipotezę, że MCT1 zostanie wykryty w domenach międzywłóknistych, a także w domenach komórek podsarkolemalnych i sarkolemalnych, podczas gdy obfitość MCT2 i MCT4 byłaby najbardziej widoczna w sarkolemmie.
- Aby przetestować te hipotezy, zbadaliśmy lokalizacje komórkowe białek transportowych MCT1, MCT2 i MCT4 w różnych typach włókien (wolno utleniające, SO; szybko utleniające glikolityczne, FOG; szybkie glikolityczne, FG) w mięśniach podeszwowych szczura przez kompleks awidyna -biotyna (ABC). ) oraz inne metody. Zastosowano plantaris, ponieważ jest to mięsień szkieletowy z mieszanych włókien.
- Poziomy MCT, białka transportera glukozy (GLUT4) i mitochondrialnego składnika oksydazy cytochromowej (COX) oceniano za pomocą immunohistochemii i Western blotting przy użyciu przeciwciał oczyszczonych przez powinowactwo.
- Metoda barwienia była specyficzna i stabilna, co pozwoliło na półilościową ocenę ekspresji MCT. Również konfokalna laserowa mikroskopia skaningowa oceniła lokalizacje izoform MCT.
- Wyniki niniejszego badania były następujące: (1) MCT1 jest zlokalizowany w sarkolemie i we wnętrzu komórki we włóknach SO i FOG, gdzie obecne było retikulum mitochondrialne; (2) w przeciwieństwie,
- MCT4 był silnie wyrażany w domenie sarkolemalnej włókien FG i FOG, ale słabo wyrażany we włóknach SO; oraz (3) konfokalna laserowa mikroskopia skaningowa wykazała, że MCT1 i COX są zlokalizowane w obu domenach międzywłóknistych i subsarkolemalnych, podczas gdy MCT2 jest tylko słabo wykrywany w sarkolemie włókien oksydacyjnych.
- MCT i związane z nimi białka są umiejscowione tak, aby ułatwić funkcję transporterów mleczanu.
Szybkie i proste wykrywanie pojedynczych nanogramów glikoprotein w żelach poliakrylamidowych i elektroblotach.
- Fluorescencyjny hydrazyd, barwnik Pro-Q Emerald 300, może być sprzężony z glikoproteinami za pomocą mechanizmu Schiffa (PAS) kwasu nadjodowego. Glikole obecne w glikoproteinach są początkowo utleniane do aldehydów przy użyciu kwasu nadjodowego.
- Barwnik reaguje następnie z aldehydami, tworząc wysoce fluorescencyjny koniugat. Redukcja pirosiarczynem sodu lub borowodorkiem sodu nie jest wymagana do stabilizacji koniugatu.
- Chociaż detekcję glikoprotein można przeprowadzić na błonach transferowych, bezpośrednie wykrywanie w żelach pozwala uniknąć elektroblottingu, a glikoproteiny można uwidocznić w ciągu 2-4 godzin elektroforezy.
- Jest to znacznie szybsze niż znakowanie PAS hydrazydem digoksygeniny, a następnie wykrywanie koniugatem przeciwciała antydigoksygeniny z fosfatazą alkaliczną lub znakowanie PAS hydrazydem biotyny, a następnie wykrywanie koniugatem streptawidyny z peroksydazą chrzanową lub koniugatem fosfatazy alkalicznej , co wymaga więcej niż ośmiu godzin. ukończyć.
- Żele i bloty znakowane barwnikiem Pro-Q Emerald 300 mogą być wybarwione barwnikiem SYPRO Ruby, co umożliwia sekwencyjne dwukolorowe wykrywanie białek glikozylowanych i nieglikozylowanych . Oba fluorofory są wzbudzane światłem UV o średnim zakresie. Pro-Q
- Barwnik Emerald 300 emituje maksymalnie przy 530 nm (zielony), natomiast barwnik SYPRO Ruby maksymalnie emituje przy 610 nm (czerwony). Po wybarwieniu barwnikiem Pro-Q Emerald 300 w żelach wykrywa się zaledwie 300 pg kwaśnej glikoproteiny alfa-1 (40% węglowodanów) i 1 ng oksydazy glukozowej (12% węglowodanów) lub awidyny (7% węglowodanów).
- Poza glikoproteinami , w żelach przy użyciu barwnika Pro-Q Emerald 300 wykrywa się zaledwie 2-4 ng lipopolisacharydu, podczas gdy 250-1000 ng jest wymagane do wykrywania za pomocą konwencjonalnego barwienia srebrem. Wykrywanie glikoprotein można osiągnąć w żelach dodecylosiarczan sodu-poliakrylamid, żelach dwuwymiarowych oraz na membranach z difluorku winylidenu.
Cienkie folie i mikrokapsułki warstwa po warstwie do bioczujników i kontrolowanego uwalniania.
- Przedstawiamy przegląd przygotowania i właściwości osadzanych warstwa po warstwie (LbL) cienkich warstw i mikrokapsułek pod kątem ich wykorzystania w rozwoju bioczujników i systemów kontrolowanego uwalniania.
- Biosensory enzymatyczne mogą być konstruowane poprzez unieruchomienie enzymów na powierzchni elektrod przez odkładanie LbL bez utraty ich aktywności katalitycznej . Oprócz polimerów syntetycznych, białka wiążące , takie jak awidyna i lektyna, są również wykorzystywane do konstruowania filmów LbL poprzez oddziaływania awidyna -biotyna i lektyna-cukier.
- Charakterystykę działania bioczujników LbL opartych na błonie można dostroić, kontrolując liczbę warstw i dobierając składniki błony. Przepuszczalność błon polielektrolitowych LbL na jony i molekuły omówiono w odniesieniu do zastosowania błon do eliminacji interferencji w biosensorach.
- Zwrócono uwagę na możliwe zastosowanie elektrod pokrytych warstwą polisacharydu LbL do budowy bioczujników oraz opisano przykłady czujników optycznych opartych na folii i mikrokapsułkach LbL.
- Następnie koncentrujemy się na zastosowaniu błon LbL i mikrokapsułek jako nośników do kontrolowanego uwalniania, w szczególności na ostatnich postępach w kontrolowanym uwalnianiu insuliny z błon i mikrokapsułek LbL.
- Filmy LbL złożone z insuliny i polimerów są wrażliwe na pH środowiska i uwalniają insulinę w odpowiedzi na zmiany pH, co sugeruje, że filmy LbL z insuliną mogą być stosowane w opracowywaniu insuliny podawanej doustnie.
- Badana jest również budowa glukozo – zależnych systemów uwalniania insuliny z wykorzystaniem mikrokapsułek insuliny LbL funkcjonalizowanych kwasem fenyloboronowym, lektyną i oksydazą glukozową .
Tworzenie wzorców enzymów w kanałach mikroprzepływowych za pomocą chemii fotoprzyłączania.
- Opracowaliśmy ogólną metodę fotowzorowania dobrze zdefiniowanych łatek enzymów wewnątrz urządzenia mikroprzepływowego w dowolnym miejscu. Najpierw warstwa pasywującego białka została zaadsorbowana na ściankach i podłodze mikrokanału poli(dimetylosiloksan)/szklanego.
- Następnie kanał wypełniono wodnym roztworem barwnika związanego z biotyną. Stosując laser Ar+/Kr+, ugrupowania fluoroforowe wybielono w celu wytworzenia wysoce reaktywnych form.
- Te aktywowane molekuły następnie przyczepiały się do zaadsorbowanych białek na ściankach i podłodze mikrokanałów za pomocą mechanizmu zależnego od tlenu singletowego.
- Enzymy połączone ze streptawidyną lub awidyną można następnie unieruchomić przez wiązanie (strept) awidyna / biotyna. Stosując ten proces, byliśmy w stanie utworzyć wzór wielu plastrów fosfatazy alkalicznej związanej ze streptawidyną wewnątrz prostego kanału mikroprzepływowego bez użycia zaworów, w wyłącznie wodnych warunkach.
- Obliczono, że gęstość fosfatazy alkalicznej w plastrach wynosi około 5% maksymalnej możliwej gęstości w porównaniu ze znanymi standardami.
- Obrót obserwowano poprzez konwersję substratu fluorogennego i mikroskopię fluorescencyjną. Zaprojektowano również bardziej złożoną dwuetapową reakcję enzymatyczną.
Avidin protein (Glucose Oxidase)
65C-CE0110 Fitzgerald 2 mg 309.6 EUR Glucose Oxidase
abx082002-1000U Abbexa 1000 U 226.8 EUR Glucose Oxidase
GZ1910-250KU Glentham Life Sciences 250 KU 457.2 EUR Streptavidin-Glucose Oxidase
65R-S124 Fitzgerald 1 mg 289.2 EUR Glucose Oxidase antibody
20R-GR007 Fitzgerald 100 µg 796.8 EUR Glucose Oxidase Antibody
abx022832-50mg Abbexa 50 mg 1262.4 EUR Avidin protein
30C-CE0101 Fitzgerald 1 gram 1123.2 EUR Avidin protein
30C-CE0101A Fitzgerald 10 mg 213.6 EUR Avidin protein
30-1056 Fitzgerald 25 mg 243.6 EUR Avidin Protein
20-abx261844 Abbexa - 777.60 EUR
- 393.60 EUR
- 276.00 EUR
- 100 mg
- 25 mg
- 5 mg
Avidin protein
PROTP02701-1 BosterBio Regular: 25mg 380.4 EUR Glucose Oxidase Concentrate, 600UL
C137-600UL Arbor Assays 600UL 171.6 EUR Biotin reagent (Glucose Oxidase)
65C-CE0203 Fitzgerald 5 mg 278.4 EUR Glucose Oxidase Assay Kit
55R-1535 Fitzgerald 100 assays 888 EUR Glucose Oxidase Assay Kit
abx298823-100Assays Abbexa 100 Assays 604.8 EUR Glucose oxidase (notatin, GOx)
G0243 Bio Basic 50KU 125.46 EUR Avidin
AD0068 Bio Basic 5mg 91.32 EUR Avidin
7-04465 CHI Scientific 5mg Ask for price Avidin
7-04466 CHI Scientific 25mg Ask for price Avidin
7-04467 CHI Scientific 100mg Ask for price Human Glucose Oxidase ELISA kit
E01G0341-192T BlueGene 192 tests 1524 EUR Human Glucose Oxidase ELISA kit
E01G0341-48 BlueGene 1 plate of 48 wells 624 EUR Human Glucose Oxidase ELISA kit
E01G0341-96 BlueGene 1 plate of 96 wells 822 EUR Native Aspergillus sp. Glucose Oxidase
DIA-193 Creative Enzymes 100KU 324 EUR Goat Glucose Oxidase ELISA kit
E06G0341-192T BlueGene 192 tests 1524 EUR Goat Glucose Oxidase ELISA kit
E06G0341-48 BlueGene 1 plate of 48 wells 624 EUR Goat Glucose Oxidase ELISA kit
E06G0341-96 BlueGene 1 plate of 96 wells 822 EUR Rat Glucose Oxidase ELISA kit
E02G0341-192T BlueGene 192 tests 1524 EUR Rat Glucose Oxidase ELISA kit
E02G0341-48 BlueGene 1 plate of 48 wells 624 EUR Rat Glucose Oxidase ELISA kit
E02G0341-96 BlueGene 1 plate of 96 wells 822 EUR Rabbit Glucose Oxidase ELISA kit
E04G0341-192T BlueGene 192 tests 1524 EUR Rabbit Glucose Oxidase ELISA kit
E04G0341-48 BlueGene 1 plate of 48 wells 624 EUR Rabbit Glucose Oxidase ELISA kit
E04G0341-96 BlueGene 1 plate of 96 wells 822 EUR Dog Glucose Oxidase ELISA kit
E08G0341-192T BlueGene 192 tests 1524 EUR Dog Glucose Oxidase ELISA kit
E08G0341-48 BlueGene 1 plate of 48 wells 624 EUR Dog Glucose Oxidase ELISA kit
E08G0341-96 BlueGene 1 plate of 96 wells 822 EUR Pig Glucose Oxidase ELISA kit
E07G0341-192T BlueGene 192 tests 1524 EUR Pig Glucose Oxidase ELISA kit
E07G0341-48 BlueGene 1 plate of 48 wells 624 EUR Pig Glucose Oxidase ELISA kit
E07G0341-96 BlueGene 1 plate of 96 wells 822 EUR Mouse Glucose Oxidase ELISA kit
E03G0341-192T BlueGene 192 tests 1524 EUR Mouse Glucose Oxidase ELISA kit
E03G0341-48 BlueGene 1 plate of 48 wells 624 EUR Mouse Glucose Oxidase ELISA kit
E03G0341-96 BlueGene 1 plate of 96 wells 822 EUR Aspergillus niger Glucose oxidase (gox)
1-CSB-BP319481DOZ Cusabio - 1008.00 EUR
- 398.40 EUR
- 2604.00 EUR
- 1362.00 EUR
- 1894.80 EUR
- 564.00 EUR
- 100ug
- 10ug
- 1MG
- 200ug
- 500ug
- 50ug
Aspergillus niger Glucose oxidase (gox)
1-CSB-EP319481DOZ Cusabio - 733.20 EUR
- 370.80 EUR
- 2192.40 EUR
- 1126.80 EUR
- 1461.60 EUR
- 476.40 EUR
- 100ug
- 10ug
- 1MG
- 200ug
- 500ug
- 50ug
Streptavidin-Glucose Oxidase (Oligomeric 5X)
65R-S125 Fitzgerald 1 mg 284.4 EUR Native Aspergillus niger Glucose Oxidase
NATE-0311 Creative Enzymes 1MU 712.8 EUR Monkey Glucose Oxidase ELISA kit
E09G0341-192T BlueGene 192 tests 1524 EUR Monkey Glucose Oxidase ELISA kit
E09G0341-48 BlueGene 1 plate of 48 wells 624 EUR Monkey Glucose Oxidase ELISA kit
E09G0341-96 BlueGene 1 plate of 96 wells 822 EUR Human glucose oxidase ELISA Kit
ELA-E1439h Lifescience Market 96 Tests 988.8 EUR EnzyChrom Glucose Oxidase Assay Kit
EGOX-100 BioAssay Systems 100 434.4 EUR Avidin protein (FITC)
65C-CE0108 Fitzgerald 2 mg 278.4 EUR Avidin protein (HRP)
65C-CE0109 Fitzgerald 2 mg 349.2 EUR Avidin antibody
70R-10658 Fitzgerald 1 mg 217.2 EUR Avidin antibody
20C-CR7024RP Fitzgerald 1 ml 146.4 EUR Avidin antibody
10-7975 Fitzgerald 1 mg 451.2 EUR Avidin antibody
10-7976 Fitzgerald 1 mg 451.2 EUR Avidin antibody
10-7977 Fitzgerald 1 mg 451.2 EUR Avidin-HRP
85R-1009 Fitzgerald 500 ul 198 EUR Human Glucose Oxidase (GOD) ELISA Kit
DLR-GOD-Hu-48T DL Develop 48T 597.6 EUR Human Glucose Oxidase (GOD) ELISA Kit
DLR-GOD-Hu-96T DL Develop 96T 776.4 EUR Human glucose oxidase,GOD ELISA Kit
CN-04496H1 ChemNorm 96T 548.4 EUR Human glucose oxidase,GOD ELISA Kit
CN-04496H2 ChemNorm 48T 367.2 EUR Guinea pig Glucose Oxidase ELISA kit
E05G0341-192T BlueGene 192 tests 1524 EUR Guinea pig Glucose Oxidase ELISA kit
E05G0341-48 BlueGene 1 plate of 48 wells 624 EUR Guinea pig Glucose Oxidase ELISA kit
E05G0341-96 BlueGene 1 plate of 96 wells 822 EUR Human Glucose Oxidase (GOD) ELISA Kit
20-abx151675 Abbexa - 8534.40 EUR
- 4550.40 EUR
- 1054.80 EUR
- 10 × 96 tests
- 5 × 96 tests
- 96 tests
Human Glucose Oxidase (GOD) CLIA Kit
abx197009-96tests Abbexa 96 tests 990 EUR Chicken Glucose Oxidase (GOD) ELISA Kit
abx351142-96tests Abbexa 96 tests 990 EUR Rabbit Glucose Oxidase (GOD) ELISA Kit
abx362469-96tests Abbexa 96 tests 990 EUR Monkey Glucose Oxidase (GOD) ELISA Kit
abx359741-96tests Abbexa 96 tests 990 EUR Pig Glucose Oxidase (GOD) ELISA Kit
abx361411-96tests Abbexa 96 tests 990 EUR Human Glucose Oxidase (GOD) ELISA Kit
abx573186-96tests Abbexa 96 tests 943.2 EUR Human Glucose Oxidase (GOD) CLIA Kit
20-abx492754 Abbexa - 9567.60 EUR
- 5095.20 EUR
- 1177.20 EUR
- 10 × 96 tests
- 5 × 96 tests
- 96 tests
Human glucose oxidase,GOD ELISA Kit
201-12-0751 SunredBio 96 tests 528 EUR Human glucose oxidase(GOD)ELISA Kit
GA-E0767HM-48T GenAsia Biotech 48T 346.8 EUR Human glucose oxidase(GOD)ELISA Kit
GA-E0767HM-96T GenAsia Biotech 96T 559.2 EUR Human glucose oxidase(GOD)ELISA Kit
QY-E01959 Qayee Biotechnology 96T 433.2 EUR Human Glucose Oxidase (GOD) ELISA Kit
RD-GOD-Hu-48Tests Reddot Biotech 48 Tests 600 EUR Human Glucose Oxidase (GOD) ELISA Kit
RD-GOD-Hu-96Tests Reddot Biotech 96 Tests 830.4 EUR Human Glucose Oxidase (GOD) ELISA Kit
RDR-GOD-Hu-48Tests Reddot Biotech 48 Tests 626.4 EUR Human Glucose Oxidase (GOD) ELISA Kit
RDR-GOD-Hu-96Tests Reddot Biotech 96 Tests 868.8 EUR Human Glucose Oxidase (GOD) ELISA Kit
SEB439Hu-10x96wellstestplate Cloud-Clone 10x96-wells test plate 5402.92 EUR Human Glucose Oxidase (GOD) ELISA Kit
SEB439Hu-1x48wellstestplate Cloud-Clone 1x48-wells test plate 550.13 EUR Human Glucose Oxidase (GOD) ELISA Kit
SEB439Hu-1x96wellstestplate Cloud-Clone 1x96-wells test plate 734.46 EUR Human Glucose Oxidase (GOD) ELISA Kit
SEB439Hu-5x96wellstestplate Cloud-Clone 5x96-wells test plate 2945.08 EUR Human Glucose Oxidase (GOD) ELISA Kit
4-SEB439Hu Cloud-Clone - 5463.60 EUR
- 2886.00 EUR
- 735.60 EUR
- 10 plates of 96 wells
- 5 plates of 96 wells
- 1 plate of 96 wells
QuickDetect? Glucose Oxidase (Human) ELISA Kit
E4447-100 Biovision each 705.6 EUR Human glucose oxidase,GOD ELISA Kit
YLA1110HU-48T Shanghai YL Biotech 48T 435 EUR Human glucose oxidase,GOD ELISA Kit
YLA1110HU-96T Shanghai YL Biotech 96T 562.5 EUR Avidin protein (Alk Phos)
65C-CE0102 Fitzgerald 1 mg 439.2 EUR Avidin protein (Texas Red)
65C-CE0112 Fitzgerald 2 mg 334.8 EUR ELISA kit for Human GOD (Glucose Oxidase)
E-EL-H1820 Elabscience Biotech 1 plate of 96 wells 640.8 EUR CLIA kit for Human GOD (Glucose Oxidase)
E-CL-H1128 Elabscience Biotech 1 plate of 96 wells 700.8 EUR ELISA kit for Human GOD (Glucose Oxidase)
ELK4798 ELK Biotech 1 plate of 96 wells 518.4 EUR Amplite™ Colorimetric Glucose Oxidase Assay Kit
11299 AAT Bioquest 500 Tests 367.2 EUR Glucose Oxidase (Food Grade): 10,000 u/g
BAK-001 Creative Enzymes 1kg 324 EUR Glucose Oxidase (170 U/mg), Aspergillus Niger
GOX-01 Alpha Diagnostics 2 mU 708 EUR Glucose Oxidase (180 U/mg), Aspergillus Niger
GOX-02 Alpha Diagnostics 2 mU 489.6 EUR Glucose Oxidase (250 U/mg), Aspergillus Niger
GOX-03 Alpha Diagnostics 2 mU 562.8 EUR W tym przypadku oksydaza glukozowa sprzężona z awidyną i peroksydaza chrzanowa sprzężona ze streptawidyną były kolejno rozmieszczone w oddzielnych łatach wewnątrz prostych kanałów mikroprzepływowych. Produkt utworzony w miejscu oksydazy glukozowej stał się substratem dla peroksydazy chrzanowej , ułożonym w dół, gdzie rejestrowano obrót substratu fluorogennego.