Skip to content

Hoxyl beads

Hybrid Quantum Chemistry magnetic beads

Menu
  • Home
  • miRNA
  • Isotype
  • PCR
  • peptide
  • Distributors
  • Polyclonal
  • Real-time
  • Recombinant
  • Contact Us
Menu

Inżynieria krystalizacji koloidalnej za pośrednictwem DNA

Posted on 10 czerwca, 202210 czerwca, 2022 by Szymon
    • DNA to potężne i wszechstronne narzędzie do samoorganizacji w nanoskali. Kilku badaczy złożyło nanocząstki i  koloidy w różne struktury, wykorzystując specyficzne dla sekwencji właściwości wiązania DNA.
    • Jednak do niedawna wszystkie zgłoszone struktury były nieuporządkowane, nawet w układach, w których można było oczekiwać uporządkowanych kryształów koloidalnych.
    • Opisujemy szczegółowo podejście eksperymentalne i przygotowanie powierzchni, które zastosowaliśmy do utworzenia pierwszych kryształów koloidalnych za pośrednictwem DNA, przy użyciu  cząstek polistyrenowych  o średnicy 1 mm .
    • Eksperymenty kontrolne oparte na oddziaływaniu zubożenia wyraźnie wskazują, że dwie standardowe metody szczepienia biocząsteczek do  cząstek koloidalnych  (biotyna/ awidyna  i rozpuszczalny w wodzie karbodiimid) nie prowadzą do uporządkowania struktur, nawet jeśli stosuje się blokery, które dają nominalnie stabilne, odwracalnie agregujące dyspersje.
    • W przeciwieństwie do tego, metoda oparta na pęcznieniu/usuwaniu pęcznienia z przekładkami z poli(glikolu etylenowego) skutkowała  cząstkami  , które łatwo tworzyły uporządkowane kryształy. Swoistość sekwencji oddziaływania jest wykazana przez kryształ wykluczający  cząstki  niosące sekwencję nieoddziałującą.
    • Zależność temperaturowa żelowania i krystalizacji dobrze zgadza się z prostym modelem termodynamicznym i bardziej szczegółowym modelem efektywnego potencjału interakcji par koloidalnych.
    • Postawiamy hipotezę, że powierzchnie uzyskane przez dwie pierwsze chemie w jakiś sposób utrudniają  cząsteczkę – walcowanie cząstki  wymagane do wyżarzania uporządkowanych struktur, jednocześnie nie wywołując znaczącej interakcji średniej siły, która zmieniłaby schemat fazowy samoorganizacji.
    • Wreszcie obserwujemy, że  kinetyka krystalizacji cząstek  staje się szybsza wraz ze wzrostem gęstości szczepionego DNA, co jest zgodne z  procesem wiązania cząstki z cząstką  , który jest reakcją, a nie ograniczoną dyfuzją.

    Wizualizacja przepływu i cytometria przepływowa z holograficzną wideomikroskopią.

    1. Strumień wideo przechwycony przez wbudowany mikroskop holograficzny można analizować klatka po klatce, aby śledzić  trójwymiarowe ruchy poszczególnych cząstek koloidalnych z rozdzielczością nanometrową, a jednocześnie mierzyć ich rozmiary i współczynniki załamania.
    2. Dzięki połączeniu akceleracji sprzętowej i optymalizacji oprogramowania, analizę tę można przeprowadzić w czasie zbliżonym do rzeczywistego za pomocą gotowego oprzyrządowania. Wydajny  algorytm identyfikacji cząstek  automatyzuje wstępne oszacowanie położenia z wystarczającą dokładnością, aby umożliwić bezobsługowe śledzenie i charakteryzację holograficzną.
    3. Rozdzielczość tej techniki dla  wielkości cząstek  jest wystarczająco dobra, aby wykryć powłoki w skali molekularnej na powierzchni kulek koloidalnych, bez konieczności barwienia lub znakowania fluorescencyjnego. Demonstrujemy to podejście do bezznakowej holograficznej cytometrii przepływowej poprzez wykrywanie wiązania  awidyny z  kulkami  z biotynylowanego  polistyrenu .

    Immobilizacja białek wiążących na nieporowatych podłożach. Porównanie obciążenia, aktywności i stabilności białka.

    1. Cztery różne nieporowate materiały w postaci cząstek, nylon,  polistyren , szkło sodowo-wapniowe i szkło z topionej krzemionki, zostały ocenione pod kątem ich przydatności jako nośników immobilizacji dla immunoglobulin.
    2. Metodę ilościowego oznaczania białka, którą zwykle stosuje się do roztworów, test kwasu bicynchoninowego (BCA), zastosowano z powodzeniem do bezpośredniego pomiaru ng ilości białka unieruchomionego na nośnikach. Badano dwa białka, przeciwciało monoklonalne przeciwko teofilinie oraz białko wiążące biotynę,  awidynę .
    3. Do pomiaru aktywności unieruchomionego białka zastosowano radioaktywną teofilinę i radioaktywną biotynę. Zdolność wiązania liganda na mm2 nośnika mierzono jako funkcję ilości unieruchomionego białka.
    4. Mierząc zarówno ilość unieruchomionego białka, jak i jego zdolność wiązania liganda, ustaliliśmy, że przeciwciało antyteofiliny zaadsorbowane na  kulkach polistyrenowych  traci prawie 90% swojej aktywności wiązania po 65 godzinach, chociaż w tym czasie z kulek traci się niewiele białka. A
    5. vidin  zachowuje prawie pełną aktywność dla biotyny na  polistyrenie . Aktywność wiązania koniugatu biotynylo-przeciwciało unieruchomionego na  polistyrenie zaadsorbowanym na awidynie  jest  stabilna, nawet przy przechowywaniu przez ponad 22 tygodnie.
    6. Przeciwciało kowalencyjnie unieruchomione na szklanych kulkach sodowo-wapniowo-krzemianowych zachowuje swoją aktywność wiązania podczas długotrwałego przechowywania, chociaż na mol unieruchomionego przeciwciała wiąże się tylko 0,1 mola 3H-teofiliny.
    7. Stosując  cząstki topionego szkła krzemionkowego  jako nośnik stały, to samo przeciwciało wiąże około 0,6 mola ligandu na mol unieruchomionego białka przeciwciała. Strukturalna „miękkość” immunoglobuliny wymaga zapobiegania interakcji z powierzchnią w celu utrzymania aktywności.

    Wpływ wielkości i kształtu cząstek  na ich margines i przyczepność do ścian: implikacje w projektowaniu nośników do dostarczania leków w skali nano-mikro.

    • Technologie donaczyniowego dostarczania leków głównie wykorzystują sferyczne nanocząstki jako  nośniki. Ich cele często znajdują się w ścianie naczynia krwionośnego lub w tkance poza ścianą, tak że lokalizacja pojazdu w kierunku ściany (margines) staje się warunkiem wstępnym dla ich funkcji.
    • W tym celu, niektóre badania wykazały, że w środowisku przepływu mikrocząstki  mają większą skłonność niż nanocząstki do  ocierania się o ścianę. Ponadto cząstki niesferyczne   teoretycznie mają większy obszar oddziaływań powierzchniowo-adhezyjnych niż  cząstki kuliste . Jednak nie zostały zgłoszone szczegółowe, systematyczne badania, które integrują różne  parametry wielkości i kształtu cząstek  w skali nano-mikro w celu zbadania ich zachowania w lokalizacji ścian w przepływie krwi bogatym w erytrocyty.
    • Zajmujemy się tą luką, przeprowadzając badania obliczeniowe i eksperymentalne z wykorzystaniem  cząstek  o czterech różnych kształtach (kulisty, spłaszczony, wydłużony, pręcik) w rozmiarach od nano do mikro. Badania obliczeniowe przeprowadzono przy użyciu pakietu Large-scale Atomic/Molecular Massively Parallel Simulator (LAMMPS), z
    • Dyssypatywna  dynamika cząstek  (DPD). Do badań eksperymentalnych,  cząstki modelowe  zostały wykonane z obojętnie pływających  kulek z polistyrenu fluorescencyjnego  , które zostały rozciągnięte termicznie w niesferyczne kształty, a wszystkie  cząstki  zostały pokryte biotyną.
    • Stosując układ mikroprzepływowy, powleczone biotyną  cząstki  przepływały przez  powierzchnie powleczone awidyną w nieobecności w porównaniu z obecnością RBC, a  adhezję cząstek  i retencję na powierzchni oceniano za pomocą odwróconej mikroskopii fluorescencyjnej.
    • Nasze badania obliczeniowe i eksperymentalne zapewniają jednoczesną analizę różnych  rozmiarów i kształtów cząstek pod kątem ich retencji w przepływie krwi i wskazują, że w obecności RBC, niesferyczne cząstki  w mikroskali  ulegają zwiększonemu „marginalizacji + adhezji” w porównaniu z cząstkami  sferycznymi w skali nano  , co skutkuje ich wyższym wiązaniem. Wyniki te dostarczają ważnych informacji na temat ulepszonego projektowania systemów dostarczania leków ukierunkowanych na naczynia krwionośne.

    Pomiary siły adhezji na sfunkcjonalizowanych mikrokulkach: Dogłębne porównanie mikropipety sterowanej komputerowo i mikroskopii sił przepływu.

    1. Charakterystyka wiązania sfunkcjonalizowanych mikrocząstek z powierzchniami o określonej chemii rzuca światło na interakcje w skali molekularnej. Adsorpcję polimerów lub białek często monitoruje się przez   osadzanie cząstek koloidalnych. Pomiary siły na mikrokulkach za pomocą mikroskopii sił atomowych (AFM) lub pęsety optycznej są standardowymi metodami w biofizyce molekularnej, ale zazwyczaj charakteryzują się niską wydajnością. Testy płukania i wirowania z (bio)chemicznie zdobionymi mikrokulkami zapewniają lepsze statystyki, ale tylko wyniki jakościowe bez skalibrowanej siły wiązania lub wartości energetycznej.
    2. W niniejszej pracy pokazujemy, że mikropipeta sterowana komputerowo (CCMP) jest prostą i wysokowydajną alternatywą do ilościowego określania adhezji powierzchniowej sfunkcjonalizowanych mikrocząstek . Jednak będąc techniką pośredniego pomiaru siły, jej dogłębne porównanie z bezpośrednim pomiarem siły jest warunkiem wstępnym zastosowań wymagających kalibrowanych wartości siły adhezji. W tym celu przymocowaliśmy  mikrokulki polistyrenowe  do stałego podłoża  wiązaniem awidyna -biotyna.
    3. Zmierzyliśmy siłę adhezji mikrokulek zarówno za pomocą specjalistycznego, zrobotyzowanego mikroskopu siłowego (FluidFM BOT), jak i CCMP. Ponadto strefę kontaktu kulki z podłożem scharakteryzowano bezpośrednio na optycznym bioczujniku falowodowym, aby określić gęstość   cząsteczek awidyny . Rozkład siły odrywania zarejestrowanej na ~50 pojedynczych kulkach przez FluidFM BOT porównano z rozkładem adhezji uzyskanym z pomiarów CCMP na setkach pojedynczych kulek. Odkryliśmy, że obie metody zapewniają jednomodalne histogramy.

Avidin Polystyrene Particles

VP-08-10 Spherotech 10 mL 450 EUR

Avidin Polystyrene Particles

VP-10-10 Spherotech 10 mL 450 EUR

Avidin Polystyrene Particles

VP-30-5 Spherotech 5 mL 346.8 EUR

Avidin Polystyrene Particles

VP-60-5 Spherotech 5 mL 346.8 EUR

Avidin Polystyrene Particles

VPX-1400-4 Spherotech 4 mL 542.4 EUR

Avidin Polystyrene Particles

VPX-60-5 Spherotech 5 mL 358.8 EUR

DiagPoly Amine Polystyrene Particles, 0.5 µm

DNM-F004 Creative Diagnostics 10 mL 714 EUR

Sodium Hypochlorite 0.5% w/v - 500mL

SH05WV05 Scientific Laboratory Supplies 500ML 19.38 EUR

Sodium Hypochlorite 0.5% w/v - 5L

SH05WV5 Scientific Laboratory Supplies 5L 30.78 EUR

DiagPoly Avidin Coated Polystyrene Particles, 0.7-0.9 µm

DNM-C001 Creative Diagnostics 10 mL 1212 EUR

DiagPoly Avidin Coated Polystyrene Particles, 1.0-1.4 µm

DNM-C002 Creative Diagnostics 10 mL 1212 EUR

DiagPoly Avidin Coated Polystyrene Particles, 3.0-3.9 µm

DNM-C003 Creative Diagnostics 5 mL 1062 EUR

DiagPoly Avidin Coated Polystyrene Particles, 6.0-8.0 µm

DNM-C004 Creative Diagnostics 5 mL 1062 EUR

Absolute Mag Avidin Magnetic Polystyrene Particles, 6 µm

WHM-G154 Creative Diagnostics 2 mL 866.4 EUR

Absolute Mag Avidin Magnetic Polystyrene Particles, 7 µm

WHM-G155 Creative Diagnostics 2 mL 866.4 EUR

Absolute Mag Avidin Magnetic Polystyrene Particles, 8 µm

WHM-G156 Creative Diagnostics 2 mL 866.4 EUR

Absolute Mag Avidin Magnetic Polystyrene Particles, 10 µm

WHM-G157 Creative Diagnostics 2 mL 866.4 EUR

Absolute Mag Avidin Magnetic Polystyrene Particles, 12 µm

WHM-G158 Creative Diagnostics 2 mL 866.4 EUR

HRP Conjugated Avidin

BA1081-0.5 BosterBio 0.5ml 175.2 EUR

TRITC Conjugated Avidin

BA1093-0.5 BosterBio 0.5ml 224.4 EUR

FITC Conjugated Avidin

BA1125-0.5 BosterBio 0.5ml 224.4 EUR

Avidin Fluorescent Particles

VFP-0552-5 Spherotech 5 mL 242.4 EUR

Avidin Fluorescent Particles

VFP-0558-5 Spherotech 5 mL 242.4 EUR

Avidin Fluorescent Particles

VFP-0562-5 Spherotech 5 mL 242.4 EUR

Avidin Fluorescent Particles

VFP-0852-5 Spherotech 5 mL 242.4 EUR

Avidin Fluorescent Particles

VFP-0856-5 Spherotech 5 mL 242.4 EUR

Avidin Fluorescent Particles

VFP-0862-5 Spherotech 5 mL 242.4 EUR

Avidin Fluorescent Particles

VFP-0870-5 Spherotech 5 mL 242.4 EUR

Avidin Fluorescent Particles

VFP-2052-5 Spherotech 5 mL 315.6 EUR

Avidin Fluorescent Particles

VFP-2058-5 Spherotech 5 mL 315.6 EUR

Avidin Magnetic Particles

VM-10-10 Spherotech 10 mL 315.6 EUR

Avidin Magnetic Particles

VM-40-10 Spherotech 10 mL 315.6 EUR

Avidin Magnetic Particles

VM-60-10 Spherotech 10 mL 388.8 EUR

Avidin Magnetic Particles

VM-80-5 Spherotech 5 mL 438 EUR

Avidin Magnetic Particles

VMS-30-10 Spherotech 10 mL 346.8 EUR

Avidin Magnetic Particles

VMS-40-10 Spherotech 10 mL 346.8 EUR

Avidin Magnetic Particles

VMX-10-10 Spherotech 10 mL 261.6 EUR

Avidin Magnetic Particles

VMX-40-5 Spherotech 5 mL 315.6 EUR

Volumetric Sol Nitric Acid 0.5% w/v Solution

N05WV5 Scientific Laboratory Supplies 5L 38.76 EUR

Eosin Y TS 0.5% (w/v) Adsorption Indicator

EOW00051 Scientific Laboratory Supplies 1L 102.6 EUR

Polystyrene Particles

PP10-008-10 Spherotech 10 mL 322.8 EUR

Polystyrene Particles

PP10-015-10 Spherotech 10 mL 322.8 EUR

Polystyrene Particles

PP10-025-10 Spherotech 10 mL 322.8 EUR

Polystyrene Particles

PP10-025-100 Spherotech 100 mL 2155.2 EUR

Polystyrene Particles

PP10-05-10 Spherotech 10 mL 322.8 EUR

Polystyrene Particles

PP10-08-10 Spherotech 10 mL 322.8 EUR

Polystyrene Particles

PP10-10-10 Spherotech 10 mL 322.8 EUR

Polystyrene Particles

PP10-15-10 Spherotech 10 mL 322.8 EUR

Polystyrene Particles

PP10-20-10 Spherotech 10 mL 408 EUR

Polystyrene Particles

PP10-50-10 Spherotech 10 mL 481.2 EUR

Polystyrene Particles

PPB-05-10 Spherotech 10 mL 213.6 EUR

Polystyrene Particles

PPB-05-100 Spherotech 100 mL 1278 EUR

Polystyrene Particles

PPB-1000-5 Spherotech 5 mL 315.6 EUR

Polystyrene Particles

PPB-60-5 Spherotech 5 mL 230.4 EUR

Polystyrene Particles

PPR-60-5 Spherotech 5 mL 249.6 EUR

Polystyrene Particles

PPX-05-10 Spherotech 10 mL 194.4 EUR

Polystyrene Particles

PPX-05-100 Spherotech 100 mL 1131.6 EUR

Polystyrene Particles

PPX-08-10 Spherotech 10 mL 194.4 EUR

Polystyrene Particles

PPX-10-10 Spherotech 10 mL 194.4 EUR

Polystyrene Particles

PPX-100-10 Spherotech 10 mL 286.8 EUR

Polystyrene Particles

PPX-1000-10 Spherotech 10 mL 261.6 EUR

Polystyrene Particles

PPX-1200-10 Spherotech 10 mL 254.4 EUR

Polystyrene Particles

PPX-1400-10 Spherotech 10 mL 254.4 EUR

Polystyrene Particles

PPX-150-10 Spherotech 10 mL 310.8 EUR

Polystyrene Particles

PPX-1600-10 Spherotech 10 mL 261.6 EUR

Polystyrene Particles

PPX-1800-10 Spherotech 10 mL 261.6 EUR

Polystyrene Particles

PPX-20-10 Spherotech 10 mL 194.4 EUR

Polystyrene Particles

PPX-200-10 Spherotech 10 mL 388.8 EUR

Polystyrene Particles

PPX-2000-10 Spherotech 10 mL 261.6 EUR

Polystyrene Particles

PPX-2200-10 Spherotech 10 mL 261.6 EUR

Polystyrene Particles

PPX-25-10 Spherotech 10 mL 194.4 EUR

Polystyrene Particles

PPX-250-10 Spherotech 10 mL 408 EUR

Polystyrene Particles

PPX-400-10 Spherotech 10 mL 254.4 EUR

Polystyrene Particles

PPX-50-10 Spherotech 10 mL 279.6 EUR

Polystyrene Particles

PPX-600-10 Spherotech 10 mL 254.4 EUR

Polystyrene Particles

PPX-800-10 Spherotech 10 mL 261.6 EUR

Polystyrene Particles

PPXR-1000-1 Spherotech 1 mL 322.8 EUR

Polystyrene Particles

PPXR-25-1 Spherotech 1 mL 322.8 EUR

Polystyrene Particles

PPXR-50-5 Spherotech 5 mL 1089.6 EUR

Polystyrene Particles

PPXR-60-1 Spherotech 1 mL 322.8 EUR

Polystyrene Particles

PP-008-10 Spherotech 10 mL 200.4 EUR

Polystyrene Particles

PP-008-100 Spherotech 100 mL 1180.8 EUR

Polystyrene Particles

PP-015-10 Spherotech 10 mL 200.4 EUR

Polystyrene Particles

PP-025-10 Spherotech 10 mL 200.4 EUR

Polystyrene Particles

PP-025-100 Spherotech 100 mL 1180.8 EUR

Polystyrene Particles

PP-05-10 Spherotech 10 mL 200.4 EUR

Polystyrene Particles

PP-05-100 Spherotech 100 mL 1180.8 EUR

Polystyrene Particles

PP-08-10 Spherotech 10 mL 200.4 EUR

Polystyrene Particles

PP-08-100 Spherotech 100 mL 1180.8 EUR

Polystyrene Particles

PP-10-10 Spherotech 10 mL 230.4 EUR

Polystyrene Particles

PP-10-100 Spherotech 100 mL 1424.4 EUR

Polystyrene Particles

PP-100-10 Spherotech 10 mL 286.8 EUR

Polystyrene Particles

PP-100-100 Spherotech 100 mL 1862.4 EUR

Polystyrene Particles

PP-15-10 Spherotech 10 mL 230.4 EUR

Polystyrene Particles

PP-150-10 Spherotech 10 mL 286.8 EUR

Polystyrene Particles

PP-20-10 Spherotech 10 mL 242.4 EUR

Polystyrene Particles

PP-20-100 Spherotech 100 mL 1521.6 EUR

Polystyrene Particles

PP-25-10 Spherotech 10 mL 249.6 EUR

Polystyrene Particles

PP-25-100 Spherotech 100 mL 1570.8 EUR

Polystyrene Particles

PP-30-10 Spherotech 10 mL 254.4 EUR
×

Dochodzimy do wniosku, że FluidFM BOT może bezpośrednio zmierzyć krzywą siły odrywania 50 mikrokulek w ciągu 150 minut. CCMP może dostarczyć skalibrowane wartości siły wiązania/adhezji 120 mikrokulek na godzinę.

Dodaj komentarz Anuluj pisanie odpowiedzi

Twój adres e-mail nie zostanie opublikowany. Wymagane pola są oznaczone *

Ostatnie wpisy

  • Przygotowanie silnika do hamowania działań
  • Ryboflawina jako obiecujący środek przeciwdrobnoustrojowy
  • Analiza immunohistochemiczna ekspresji MCT1, MCT2 i MCT4 w mięśniu podeszwowym szczura.
  • Wieloośrodkowe, randomizowane badanie z podwójnie ślepą próbą
  • Niedobór alfa1-antytrypsyny

Najnowsze komentarze

    Kategorie

    • exosome
    • immune
    • Isotype
    • miRNA
    • PCR
    • peptide
    • Polyclonal
    • Purification
    • Real-time
    • Recombinant
    • Uncategorized

    Archiwa

    • czerwiec 2022
    • czerwiec 2021
    • maj 2021

    Kategorie

    • exosome
    • immune
    • Isotype
    • miRNA
    • PCR
    • peptide
    • Polyclonal
    • Purification
    • Real-time
    • Recombinant
    • Uncategorized

    Meta

    • Zaloguj się
    • Kanał wpisów
    • Kanał komentarzy
    • WordPress.org
    marzec 2023
    P W Ś C P S N
     12345
    6789101112
    13141516171819
    20212223242526
    2728293031  
    « cze    

    Beads and fluorescent Particles

    Kategorie

    • exosome
    • immune
    • Isotype
    • miRNA
    • PCR
    • peptide
    • Polyclonal
    • Purification
    • Real-time
    • Recombinant
    • Uncategorized

    Ostatnie wpisy

    • Przygotowanie silnika do hamowania działań
    • Ryboflawina jako obiecujący środek przeciwdrobnoustrojowy
    • Analiza immunohistochemiczna ekspresji MCT1, MCT2 i MCT4 w mięśniu podeszwowym szczura.
    • Wieloośrodkowe, randomizowane badanie z podwójnie ślepą próbą
    • Niedobór alfa1-antytrypsyny

    Quick Links

    • Contact Us
    • Distributors
    • Home
    • Konferencje
    • Nagrody i Stypendia
    • Projekty Badawcze
    • Publikacje
    © 2023 Hoxyl beads | Powered by Superbs Personal Blog theme